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    通道载玻片--新的免疫荧光方法

    2016-05-11 14:53:50  来源：
    细胞的免疫荧光实验是一个基础的细胞实验，传统的方法是在培养板中放入预先处理好的盖玻片，待细胞贴壁后，使用镊子将盖玻片拿出再开始进行固定，染色等系列工作。
     
    现在分享一种简便的免疫荧光方法，无需爬片，培养-操作-镜检，在一个培养皿/载玻片上完成所有工作！一气呵成！

    使用如图的培养皿和载玻片，免疫荧光步骤将简化为：
    1. 直接细胞培养
    2. 冲洗玻片/培养皿
    3. 固定细胞
    4. 冲洗玻片/培养皿
    5. 染色
    6. 冲洗玻片/培养皿
    7. 冻存液处理细胞
    8. 直接镜检观察
     
    免去了指甲油封片的传统免疫荧光方法中的冗长步骤：
    1. 无需对盖玻片和载玻片消毒灭菌
    2. 无需对盖玻片进行包被
    3. 无需等细胞爬片
    4. 无需指甲油封片
     
    之所能如此简便完成免疫荧光实验，是因为这些ibidi培养皿和载玻片的底部为特殊处理的材质，绝大多数细胞可以直接贴壁生长，而不需要另外包被。同时，这些耗材的底部薄如盖玻片，可以直接使用倒置显微镜进行观察，得到高质量的成像，适用于高端显微镜比如共聚焦显微镜。
    成像效果：
     

    下面再分享一种*的免疫荧光方法，不仅更加简化实验步骤，而且可以节约试剂和细胞，同时还能得到更出色的成像效果。
     

    如图的ibidi通道载玻片，简单快速完成免疫荧光实验。
    步骤：培养-固定-染色-镜检，只需在这个载玻片上进行4个步骤，免疫荧光实验轻松完成~
    优点总结：
    1. 节约细胞和试剂
    ibidi通道载玻片里的通道只有400μm高，以μ-slide VI为例，通道的容积只有30μl，而普通8well的腔式载玻片一个孔的容积有300μl。这意味着通道需要的试剂和细胞量仅需约十分之一！对于非常珍贵的细胞和试剂来说，这可是非常重要的。
     

    2.成像效果好
    使用通道载玻片时，能在相差显微镜下获得更好的成像效果。因为通道上下都是平坦的，不会因为凹液面的折射现象影响到相差显微镜成像。而well式的开放小室的相差成像会受到培养皿盖和液面的折射现象影响。
     

    3.细胞分布均匀
    在通道载玻片中，由于没有培养皿壁的影响，铺入细胞后，不需要平时的混匀操作，细胞的分布就非常均匀了。而使用开放小室，有可能在铺细胞混匀后，细胞还是会聚集在小室的边缘或中心上。如下图所示。a 是明场相差成像，b为荧光成像。
     

    免疫荧光本身就是个十分基础的实验，如今的科技更是便利了实验，实验也发展了科技。
    以上方法分享给有需要的，奔跑在科研前沿的童鞋们~更快更省地做好免疫荧光噢！
     

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    邵琼 女士
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