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全自动组织研磨机破碎酵母细胞实验-上海净信
2017-07-20 16:59:11 来源：实验地点：中科院生物物理所生物大分子国家重点实验室用户：常文瑞组
实验方法1、破碎前的准备：0.1g菌体（本实验以0.1g菌体为例）；直径3号陶瓷珠；研磨机（选用品牌上海净信科技TS-24）；预处理好的2ML研磨管；模块冷冻。
2、研磨：0.1g菌体，5000r/min离心1 min后去上清，加入等体积的玻璃珠，加入0.5ML PBS溶液，放入预先冷冻好的模块中，放入上海净信科技的研磨机中，调整频率为60Hz，震荡时间60s.注：破菌效率随着液体体积的增加而增加，液体体积达到100ul时开始达到*大破菌效率。附：陶瓷珠回收，以下是方法：1、将含陶瓷珠的EP管，放置在大烧杯中，用自来水中浸泡2－3天。2、用镊子将陶瓷珠和细胞碎片等全部抖落到烧杯中。静置待玻璃珠沉淀后，轻轻将上面悬浮的细胞碎片倒掉，在加水重悬陶瓷珠。3、重复步骤2，4－5次直到所有的细胞碎片都去除干净。4、加入适量的浓硝酸（将陶瓷珠全部覆盖即可），浸泡过夜。5、去离子水洗三次，置烘箱中干燥即可。
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